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靈芝的化學成分
靈芝類所含化學成分複雜，且因所用菌種培養方法、提取方法等不同而異。研究靈芝類的化學成分的目的，在於瞭解和比較靈芝屬不同品種及同一品種的不同發育階段（如子實體、菌絲體、孢子體）所含的化學成分，通過藥理及臨床研究確定其有效成分或有效部分。為進一步研究靈芝藥理作用機制、提高臨床療效、改進生產工藝及質量控制標準提供理論根據。目前研究較多的靈芝化學成分有：三萜類化合物、多糖類、核苷類、甾醇類、生物鹼類、呋喃衍生物、氨基酸多肽類、無機元素、脂肪酸等。
第一節 三萜類化合物
三萜類化合物是靈芝的主要化學成分之一，靈芝中的很多三萜類化合物具有生理活性，如ganoderic acid A. B. C.和D能夠抑制小鼠肌肉細胞組胺的釋放。ganoderic acid F有很強的抑制血管緊張素酶的活性。赤芝孢子酸A對CCl4和半乳糖胺及丙酸桿菌造成的小鼠轉氮酶升高均有降低作用。赤芝孢子內酯A具有降低膽固醇作用。因此對三萜類化合物的進一步深入研究將有利於靈芝有效成分的尋找和進一步闡明其生理活性。
1982年Kubota. T等人首次從赤芝子實體中分離得到三萜類化合物，此後十年來，對三萜類化合物研究最多的是日本，其次是中國（包括臺灣）。到目前為止已先後從赤芝子實體和孢子粉中分到了103種新的三萜類化學成分
一、三萜類化合物提取和分離
靈芝中三萜類化合物的提取分離方法可以分為三類，一類是用甲醇或者乙醇提取原料，提取物直接進行層析分離，如H. Konda等用甲醇提取原料，提取物濃縮後懸浮于水，依次用已烷、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯部分經矽膠色譜、高效液相層析（HPLC）分到四個三萜酸。第二類方法是用甲醇、乙醇等提取原料，然後分出總酸部分，進行分離，如Morigiwa等人用70%甲醇提取原料，提取物用1mol/L HCl調pH2~3，再用乙酸乙酯萃取，濃縮後進行分離，分到五個三萜類化合物。Nishitoba等人用乙醇提取原料，提取物濃縮後在水和CHCl3中進行分配，CHCl3層濃縮至一定體積後，用飽和的NaHCO3水溶液萃取，萃取物用6mol/L HCl酸化到pH3~4，水溶液中出現的沉澱以CHCl3溶解，乾燥後得總酸提取物，經矽膠柱層析分到五個三萜類化合物。第三類方法是利用製備衍生物的方法進行分離，如KiKuchi等用乙醚提取原料，其酸性部分用重氮甲烷進行甲基化，然後再在矽膠柱上進行分離，從中分到七個三萜酸。Hirotani等用90%MeOH-H2O提取，提取液減壓濃縮後加入5%Na2CO3水溶液鹼化至pH9，然後用CHCl3萃取，水層用4mol/L H2SO4酸化至pH2，再用CHCl3萃取，CHCl3萃取液用水洗，Na2SO4乾燥，濃縮後得總酸部分，該部分再以常規方法用重氮甲烷進行甲酯化，矽膠柱色譜，得到三個新的三萜酸。
靈芝中三萜化合物的分離大多是經過反復矽膠柱層析，較純的部分薄層、低壓柱，高效液相色譜（正反相）製備等方法進行分離純化。矽膠柱色譜一般常用的展開劑為MeOH-CHCl3，EtAc-C6H6，EtoAc-acetone，EtOAc-CHCl3，CHCl3-MeOH-H2O等系統。HPLC多用乙腈—乙酸銨緩衝溶液以及MeOH-H2O洗脫。薄層檢查一般使用的展開劑為CHCl3-MeOH（95∶5，9∶1V/V）或苯—乙酸乙酯（3∶7V/V），香蘭醛-硫酸做為薄層斑點的顯色劑。
我們曾從赤芝孢子粉酸性脂溶部分中分到七個三萜類化合物，其中五個四環三萜酸，一個四環三萜醇，二個五環三萜內酯化合物，並對它們的結構進行了測定證明有三個新化合物，其餘均為首次從赤芝孢子粉中分離出來。下面是三萜類化合物提取分離流程。
二、三萜類化合物的結構測定
（一）三萜類化合物的結構特點
靈芝三萜類化合物分為四環三萜和五環三萜。從靈芝四環三萜類化合物的結構來看，屬於高度氧化的羊毛甾烷衍生物。按分子所含碳原子數可分為C30，C27和C24三大類，根據其所含功能團和不同的側鏈可有以下六種基本骨架。
在三萜酸的結構中，環上的雙鍵大多位於△8（9）位，在C11位和C23位大部分有羰基，而且在C3、C7、C15位也多被羥基或羰基所取代。在三萜醇、醛和過氧化物的結構中環上大多存在兩個不飽和雙鍵，其位置在△7（8），△9（11）位，C11位和C23位也不存在羰基而且環上的取代基明顯減少。表6-1列出了迄今為止分到的所有靈芝三萜化合物。目前靈芝三萜化合物的命名有些混亂，同一化合物有不同的名稱，對此我們採用最早的命名。
（二）三萜類化合物的光譜特徵
1.紅外光譜:靈芝中的三萜類化合物大多都有羥基,因而在3300cm-1，1050cm-1有強的羥基吸收峰。三萜酸類化合物在2600∼2400cm-1有弱吸收峰，當羧酸被酯化以後這一吸收峰消失。在C15位有羰基的化合物在1740∼1760cm-1會出現五元環酮的吸收特徵峰。在1720cm-1（酯），1710cm-1（六元環酮），1650cm-1（α、β不飽和酮）也有較強的吸收峰。
2.紫外光譜：由於靈芝中的三萜類化合物大多都有共軛體系存在，因而紫外吸收波長和強度也很有規律，凡在C11位存在羰基的化合物都存在著△8（9）雙鍵，這類化合物的紫外吸收大多在λmax253nm，logε在3.8∼4.1之間，而C11位沒有羰基的化合物，大多存在著△7（8）、△9（11）共軛雙鍵，因而紫外吸收在λmax237nm，244nm，253nm有三個吸收峰，而吸收強度大多在logε3.7∼4.1之間。而在既沒有α、β不飽和酮，又沒有共軛雙鍵的化合物中，紫外光譜僅表現簡單的雙鍵末端吸收在λmax210nm logε4.2左右。
3.質譜：四環三萜化合物質譜裂解的共同特徵是失去側鍵。羊毛甾烷類的特徵裂解是從D環斷裂，伴有一個質子的轉移，然後經第二次裂解失去側鏈和D環的一部分。Kikuchi[11] 在這方面作了很多研究，總結出這類化合物的裂解方式大致如下：
4.核磁共振譜：三萜類化合物的1HNMR中主要信號是雙鍵質子，連氧碳質子和甲基質子（見表6-2）。環內雙鍵質子的δ值一般大於5×10-6，在靈芝三萜化合物中，如ganoderic acid R. S. T. X. Y. Me等的雙鍵位置在△7（8）和△9（11），7位質子的δ值在（5.48∼5.86)×10-6之間,11位質子的δ值比7位要處於高場,在δ(5.31∼5.39）×10-6之間，側鏈上雙鍵的位置可分為二類，一類在△20（22），20位元質子的信號在δ（6.04∼6.12)×10-6，如ganoderenic acid A.B.C.D等。另一類在△24（25），24位元質子的信號在δ（5.4∼5.7）×10-6，如ganoderol A和B。
連氧碳質子由於位置、環境和構型的不同，其化學位移變化較大。在C3、C7、C12、C15為羥基取代的化合物中由於羥基構型不同，該碳所連接H的化學位移值和偶合常數也不同，3—H多為α構型，δ值在(3.22∼3.31)×10-6，J=10Hz，7—H為α構型時δ：（4.75∼4.85)×10-6，J=9Hz，7—H為β構型時，δ：（4.4∼4.5)×10-6，J=5Hz。12—H多為α構型，δ：（4.5∼4.9)×10-6。15—H多為β構型，δ（4.2∼4.90)×10-6。三萜中的甲基信號上有較多的取代基，對甲基的化學位移影響較大。18—CH3通常在δ（0.95∼1.0)×10-6之間，當分子中存在△7（8）、△9（11）共軛雙鍵時，該甲基信號向高場位移至δ（0.55∼0.60)×10-6，當12位元有羥基取代時，該信號出現在δ0.85×10-6左右。21—CH3信號通常出現在δ（0.85∼1.0）×10-6之間，為雙峰，但當20位元有羥基取代時，該信號向低場位移，出現在δ（1.4∼1.6）×10-6，當存在△20（22）雙鍵時，該信號出現在δ2.1×10-6，且都為單峰。27—CH3通常出現在δ（1.1∼1.2）×10-6，當存在△24（25）雙鍵時，該甲基信號在δ1.6×10-6左右。32—CH3受7位和15位取代基的影響較大。當7位和15位同時被羰基取代時，該號在δ（1.6∼1.8）×10-6之間，當7位和15位均為羥基或一個羥基一個羰基時則無明顯變化均出現在δ（1.2∼1.3）×10-6之間，當7位和15位元無取代基時，該甲基信號則出現在δ0.88×10-6左右。30—CH3和31—CH3受3位取代基影響較大，當3位是羥基時30—CH3在δ1.0×10-6左右，31—CH3在δ0.85×10-6左右。當3位是羰基時，17—H在δ1.8×10-6左右，而當15位是羰基時17—H向低場移至δ2.2×10-6左右。從17—H的位置可以判斷C15位所連接的基團。
13CNMR的運用使得化合物基本骨架的確定日趨準確。三萜化合物的碳譜中最容易分辨的信號來自雙鍵碳原子和連氧碳原子。前面提過靈芝三萜母核上的雙鍵位置有兩類，在△8（9）這類化合物中，C8在δ（151∼160）×10-6，C9在δ（140∼146）×10-6，在△7（8）和△9（11）這類化合物中C7在δ（120∼121）×10-6，C8在δ（140∼142）×10-6，C9在δ（141∼145）×10-6，C11在δ（115∼117）×10-6。側鏈上的雙鍵位置也有兩類，一類是△20（22），C20在δ（154∼157）×10-6，C22在δ（124.3∼124.7）×10-6；另一類是△24（25），C24在δ（139∼145）×10-6，C25在δ（126∼129）×10-6。當下列各碳連有羥基時，它們的化學位移值分別為C3δ（77∼79）×10-6，C7δ（66∼68）×10-6，C12δ（77∼79）×10-6，C15δ（72∼74）×10-6。當下列各碳連有羰基時，它們的化學位移值分別為C3δ（215∼216）×10-6，C7δ（198∼200）×10-6，C15δ（205∼217）×10-6，C23δ（207∼208）×10-6。羧酸酯的化學位移在δ（170∼178）×10-6。C3、C7、C15取代基不同時，C1在δ（35∼37）×10-6，C2在δ（34.1∼34.8）×10-6，C4在δ（46∼47）×10-6，當C3連接的是羥基時，這三個碳的信號均向高場位移，C1在δ34×10-6，C2δ27×10-6，C4δ38×10-6左右。C7是羰基取代時C6在δ（33∼37）×10-6，C7是羥基取代時C6在δ（26∼28）×10-6。C15是羰基時C14在δ（57∼59）×10-6，C15是羥基時，C14在δ（52∼53）×10-6。
近年來發展起來的1H—1H和1H—13C COSY等二維核磁共振譜已應用在靈芝三萜結構的測定中。
5.旋光光譜：旋光光譜主要是解決絕對構型問題，從文獻報導的CD譜資料總結出CD譜與絕對構型關係；凡是具有[I]式絕對構型者，C7為羥基，不管3位或15位是羥基或羰基取代，CD譜都呈現下列Cotton效應，（290∼295）nm（—），（248∼257）nm（+），（207∼217）nm（—）；凡是在[I]式結構中C7為酮基者，則不管3位或15位的取代基如何，都呈現如下Cotton效應：（305∼307）nm（—），（272∼278）nm（+），（253∼256）nm（—），（225∼231）nm（+）。
Nishitoba等人在鑒定epoxyganoderiol A的絕對構型時，應用CD譜確定了C24和C25的絕對構型。在epoxyganoderiol A的側鏈上存在著一個環氧基團，為了確定24和25位是S還是R，首先以羊毛甾醇為原料，經反應得到S和R兩種構型的化合物，反應如下：
a)AC2O/pyridine, b) SeO2/dioxane, c) NaBH4/CeCl3·7H2O/MeOH-THF
d)(+)-DETor (-) -DET/Ti (O1Pr) 4/TBHP/CH2Cl2
分別將7b和7a溶於CCl4溶液中，加入Eu（fod）3絡合物，測其旋光譜，得到如下結果：
以上兩個化合物的CD譜的Cotton效應是與C25的Newman投影相一致的。正Cotton效應為25S負Cotton效應為25R。在相同條件下測epoxyganoderiol A的CD譜，顯示313nm（△ε+10.9）為正Cotton效應，證明25位的絕對構型為S，通過測定NOE，證實24位絕對構型為S。
（三）結構測定中的化學反應
隨著儀器分析新技術、新方法的發展，各類譜學方法和X射線—衍射等分析手段已在結構測定中得到了廣泛的應用。經典的化學方法與儀器分析相結合，使三萜化合物的結構測定快速而準確並達到了微量的水平。化學反應常用于證實分子骨架中取代基類型、數目、位置及構型等。
1.氧化反應 氧化反應主要用來確定分子中所含羥基、羰基或酰基的數目和位置等。應用較多的是將羥基氧化成羰基，比較常用的是鉻酐—吡啶的方法，也有將鉻酐溶於AcOH中攪拌加入樣品中，室溫下攪拌2h，用水稀釋，氯仿提取，提取液經水洗乾燥濃縮後經薄層製備而得到氧化產物。
2.酰化反應 酰化反應對於確定分子中羥基的數目、性質、構型很有幫助，常用的乙酰化反應，通常採用醋酐—吡啶室溫處理的方法。
3.水解 由於部分靈芝三萜酸中帶有乙酰基，為確定乙酰基的存在和數目，採用了水解的方法，如Komoda將ganoderic acid F溶於甲醇，用5%Na2CO3室溫處理3h後，用2mol/L HCl酸化，除去甲醇後用CHCl3萃取，水洗CHCl3液後Na2SO4乾燥，蒸幹。通過TLC製備得水解產物。
4.還原 還原反應主要用來確定分子中有無不飽和雙鍵及羥基、羰基、取代基的位置。如Nishitoba等人在確定lucidenato G結構時，為了證實C26位上存在著羥基，先將lucidenate G甲基化，然後再用NaBH4進行還原，得到其丙酮化物，從而證實了C26位存在
第二節 多糖類化合物
多糖類化合物是靈芝所含化學成分之一，現已證明，靈芝多糖類具有抗腫瘤作用、免疫調節作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用和抗衰老作用，故靈芝多糖類是靈芝的主要有效成分。臨床試驗也證實，靈芝多糖可作為腫瘤化學治療和放射治療的有效輔助治療藥。有關靈芝多糖類的分離、純化、結構確證的研究方興未艾，迄今仍為國內外矚目的重要課題。
一、靈芝多糖類的分離、純化及鑒定
靈芝多糖類的分離、純化及結構確證的方法及步驟可概括如下：多採用熱水提取、分部沉澱的方式分離靈芝的多糖組分；進一步經各種層析如DEAE纖維素柱色譜、Sephadex G75柱色譜，凝膠過濾如Sepharose CL—4B凝膠過濾，高壓電泳和聚丙酰胺凝膠電泳等處理可獲純化的多糖；後者經酸水解、紙色譜、氣相色譜分析可確定其單糖組分，經酶水解可檢測殊碳糖（anomeric）結構；經甲基化技術及Smith降解、氣相色譜、氣質聯用、紫外及紅外光譜分析、核磁共振等可確定多糖的連接方式和基本化學結構。多糖的分子量可通過凝膠柱色譜如SephadeaxG—100柱色譜、超離心測沉降係數等方法測定，一般在測得分子量範圍後，求出平均分子量。
二、靈芝多糖類的理化特性
由於靈芝的種類、產地、分離提取方法各異，所獲靈芝多糖的理化特性、分子量、單糖組分和連接方式不同，生物活性亦有差異。如Hiroshi等（1985）報導，赤芝子實體熱水提取物經濃縮、透析及系列色譜後獲得兩種多糖ganoderan A和B。ganoderan A的分子量9 300，旋光度[α]D+58.8°，ganoderan B分子量3 600，旋光度[α]+33.3°，二者對小鼠均具降血糖作用。隨後，他們又從赤芝子實體中分離出兩個降血糖有效成分ganoderan B和C，均為糖肽，分子量分別為7 400和5 800。物理化學和化學研究證明，ganoderan B含吡喃葡萄糖酰基β-1→3主鏈和β-1→6側鏈，ganoderan C則含D-吡喃葡萄糖酰基β-1→3和β-1→6連接和D-吡喃半乳糖酰基α-1→6連接。Mizuno等（1986）報告，赤芝子實體經85%乙醇（80℃），熱水（100℃），3%草酸銨（100℃）和5%氫氧化鈉（30℃）提取後，殘渣再用5%氫氧化鈉（含0.1%硼氫化鈉，80℃），20%氫氧化鈉（含0.1%硼氫化鈉，30℃）和5%氯化鋰（溶於二甲醋酸銨中，70℃）提取，獲多糖組分A、B、C。A和B經乙醇分離，醋酸沉澱，Sepharose CL-4B凝膠過濾，得4個β-葡聚糖，其中I和II來自A，III和IV來自B。從C分離出脫乙酰殼多糖（chitosan）（V）。I—V經80%甲酸（85℃）處理可獲相應的甲酰化多糖和低分子量多糖。I—IV主要由葡萄糖和少量的糖醛酸、木糖、甘露糖組成，並具β-（1→3）-D-葡聚糖主鏈和β-（1→6）葡萄糖基側鏈，其分子量分別為330 000、60 000、160 000和110 000。不同之處是IV不含木糖，但含1.2%蛋白質。V經酸水解後，主要含葡萄糖胺，並含少量葡萄糖，經紅外光譜和X射線分析證明為脫乙酰殼多糖。給小鼠腹腔注射II、III以及III的甲酸酯和I∼IV的低分子量多糖均具有宿主仲介性的抗腫瘤活性，半數抑瘤量（ID50）分別為42.5mg/kg、34.1mg/kg、70.2mg/kg、22.4mg/kg、17.0mg/kg、32.1mg/kg和25.8mg/kg。Mizuno等（1985）報告，赤芝子實體經水提取後，其殘渣經3%草酸銨溶液（100℃）和5%氫氧化鈉溶液（30℃）提取後，得2個水不溶多糖A和B。A經真空濃縮、透析、凍幹，Shepharose CL-48凝膠過濾，獲主要組分C。B用醋酸中和至pH5∼6，得酸性異多糖D，加乙醇沉澱得糖蛋白E和另一種異多糖。C由酸性β-D-葡聚糖構成，含葡萄糖77%、葡萄糖醛酸10.3%以及少量的果糖、木糖、甘露糖和半乳糖，分子量10 000∼30 000。D的分離程式同A，它含兩個主要成分G和H，G和H均為酸性異多糖，分別含葡萄糖92%和95%，葡糖醛酸9.7%和13.0%以及少量果糖、木糖、甘露糖、乳糖，分子量70 000∼100 000。給小鼠腹腔注射A—H對S180均具有抗腫瘤活性，50%抑瘤量為（6.3∼26.3)mg/kg，但口服無效。1989∼1994李榮芷、何雲慶等先後報告，赤芝子實體經熱水提取，乙醇分部沉澱、透析、除蛋白等步驟得靈芝多糖BN3A、BN3B、BN3C和GL-A、GL-B、GL-C。進一步經DEAE纖維素柱色譜分離，酶解，酸水解，過碘酸氧化，甲酸生成，Smith降解、氣相色譜、高壓液相色譜分析和光譜分析等從BN3B、BN3C、GL-A、GL-B和GL-C中共分離鑒定了18個靈芝多糖均一體，其中5個肽多糖、4個葡聚糖，其餘為雜多糖，其化學結構及分子量見表6-4。
第三節 靈芝的其他化學成分
靈芝除了含有多糖和三萜類化學成分以外，還含有核苷類、甾醇類、生物鹼類、氨基酸多肽類和呋喃衍生物等化學成分。
一、核苷類
核苷類是具有廣泛生理活性的一類水溶性成分，餘競光等從薄蓋靈芝菌絲體中分離得到五種核苷類化學成分，其中靈芝嘌呤是新化合物。Shimiz等人從赤芝子實體中也得到四種核苷類化合物。靈芝中核苷類化合物的提取方法一般是將靈芝菌絲體乙醇提取物濃縮後溶于水，依次以乙醚、乙酸乙酯萃取，萃 取後的水溶液通過陽離子樹脂處理，流出的溶液及水洗液通過大孔樹脂色譜，得到尿嘧啶核苷、尿嘧啶。交換後的陽離子樹脂用NH4OH處理，依次用乙醇、水洗脫。95%乙醇洗脫部分經矽膠柱色譜及製備薄層色譜得到腺嘌呤、腺嘌呤核苷和靈芝嘌呤等。這幾種核苷類的結構如下：
由赤芝孢子粉和薄蓋靈芝菌絲體制成的增肌注射液在臨床上廣泛應用於進行性肌營養不良，萎縮性肌強直等疾病的治療，並有較好的療效。動物實驗證明尿嘧啶和尿嘧啶核苷對實驗性肌強直症小鼠血清醛縮酶有降低作用。SHimizu等人發現腺嘌呤核苷有很強的抑制血小板凝集血小板凝聚的作用和鎮靜、抗缺氧及促進心肌組織攝取86Rb的作用。
二、甾醇類
靈芝中甾醇含量比較高，僅麥角甾醇含量就達千分之三左右。已知從靈芝中分到的甾醇有近二十種，其骨架分為麥角甾醇類和膽甾醇類兩種類型，甾醇類化合物有麥角甾醇（ergosterol），麥角甾醇棕櫚酸酯（ergosta-palmitate）；麥角甾-7，22-二烯-3-酮（ergosta-7,22-dien-3-one）；羊毛甾-7，9（11），24-三烯-3β，21-二醇（lanosta-7,9(11),24-trien-3β,21-diol）；麥角甾-7，22-二烯-3β-醇（ergosta-7,22-dien-3β-ol）；5α-豆甾烷-3.6-二酮（5α-stigrmastan-3.6-dione）；β-穀甾醇（β-sitosterol）；24-甲基膽甾-7-烯-3β-醇[（24s）-24-methyl-5α-cholest-7-en-3β-ol]；麥角甾4.6,8(14),22-四烯-3酮（ergos-ta-4,6,8(14),22-tetra-en-3-one）;24(s)-24—甲基5α-膽甾-7，16-二烯-3β-醇，[(24s)-24-methyl-5α-cholest-7,16-dien-3β-ol]；異麥角甾酮（iso-ergosteion)；以及麥角甾醇過氧化物（ergosterol peroxide),ergosta-7,22-dien-3β-yl linoleate,5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-yl lionleate,ergosta-7,22-dien-2β,3α,9α-triol等。
甾醇類化合物的提取分離多以乙醇提取原料，然後用乙醚萃取，再用NaHCO3水溶液萃取乙醚溶液，除去酸性部分，然後用矽膠柱層析分離甾醇類化合物，甾醇類化合物的生理活性報導很少。
三、生物鹼類
靈芝中的生物鹼含量比較低，僅從野生靈芝、赤芝孢子粉、薄蓋靈芝中分到過生物鹼，有膽鹼（choline）；甜菜堿（betains）及其鹽酸鹽γ-三甲胺基丁酸（γ-butyrobetaine），靈芝堿甲（ganoine,I），靈芝堿乙（ganodine,II）。
靈芝生物鹼的分離一般是用乙醇和水相繼提取，提取物經乙醚脫脂，水溶部分採用雷氏鹽沉澱法或樹脂法得到含氮部分，再經薄層色譜和製備薄層色譜得到單體生物鹼。
靈芝中生物鹼雖然含量較低，但有些具有一定的生物活性，γ-三甲胺基丁酸在窒息性缺氧模型中有提高存活時間的作用，以及能使離體豚鼠心臟冠脈流量增加。甜菜堿臨床上將其和N-脒基甘氨酸（glycocyamine）共用以治療肌無力[18]。
四、呋喃衍生物
靈芝中的呋喃衍生物類是從發酵的薄蓋靈芝菌絲體乙醇提取物乙酸乙酯溶解部分經矽膠柱色譜得到的，有以下幾種化合物，並未見生理活性的報導。
1.R=CH2OH(5-羥甲基呋喃甲醛) 1,1′=α-糠醛基二甲醚
2.R=CH2OCOCH3(5-乙酰氧甲基呋喃甲醛)
3.R=CH2OC4H9(5-丁氧甲基呋喃甲醛)
五、氨基酸多肽類
靈芝中的氨基酸有天門冬氮酸、谷氨酸、精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸、脯氨酸、丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、纈氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、γ-丁基氨酸等，併發現有含硫氨基酸，其結構經X-衍射分析確定為硫組氨酸甲基內銨鹽。其結構如下：
實驗證明天門冬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、酪氨酸、精氨酸、賴氨酸、亮氨酸、丙氨酸等可以提高小鼠窒息性缺氧的存活時間。
從靈芝中還分到多肽類化合物，其中有兩種中性多肽，一種水解後鑒定含有亮氨酸、酪氨酸、纈氨酸、脯氨到、丙氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、甘氨酸等八種氨基酸；另一種多肽可使小鼠窒息性缺氧的存活時間由21min50s提高到45min47s。水解後鑒定含有苯丙氨酸、酪氨酸、脯氨酸、丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、天門冬氨酸等。分離到的酸性多肽經水解得到十一種氨基酸，鹼性多肽經水解得到四種氨基酸，初步確定氨基酸排列次序是鳥氨酸—甘氨酸—脯氨酸—脯四肽。
氨基酸的分離採用色譜、電泳雙向色譜等方法，與已知品對照，茚三酮顯色，進行鑒定，近年來儀器的發展使得氨基酸分析更現代化，用氨基酸分析儀即可得到各種氨基酸的數量和含量。肽的鑒別是靠高壓電泳及雙向色譜方法。
六、無機元素
靈芝中含有多種微量元素，有Mn，mg，Ca，Cu，Ce，Sr，Ba，Zn，Fe，P，B，Cr，Ni，V，Ti等，靈芝的鍺（Ge）含量與一般植物相似，但它對鍺的富集能力比較強，很多研究者將無機鍺加入靈芝培養基（液）中以得到較高含量的有機鍺。鍺並非靈芝的主要有效成分。
七、其他
從靈芝中還得到一些脂肪酸、長鏈烷烴等，有苯甲酸、硬脂酸、棕櫚酸、十九烷酸、廿二烷酸、廿四烷酸、卅一烷、廿四烷，還有甘露醇、海藻糖、煙酸等。
關於靈芝及其製劑的質量控制問題。
靈芝及其製劑在臨床上應用比較多，其質量控制問題一直是許多生產廠家和科研工作者研究的課題，但在這方面的報導並不多，根據我們多年對靈芝的研究的經驗，認為應以多糖和三萜的含量做為栽培和野生靈芝的質量控制標準，這是因為靈芝含有較多的多糖，而且這些多糖大多具有提高免疫功能的作用，這與靈芝滋補強壯、扶正固本的作用是一致的。靈芝中含量比較高的另一類成分是三萜，而且一些三萜化合物已在幾個方面表現比較強的生理活性，因此三萜含量的測定可以作為靈芝的質量控制標準之一。 |
